大豆肽的功能性應(yīng)用

第1章大豆肽對免疫力的調(diào)節(jié)作用 1
1.1引言1
1.1.1免疫調(diào)節(jié)對人體健康的重要性1
1.1.2肽對免疫力調(diào)節(jié)作用的研究現(xiàn)狀1
1.1.3本章研究內(nèi)容與意義1
1.2研究方法2
1.2.1大豆肽的制備2
1.2.2大豆肽的SDS-PAGE分析2
1.2.3大豆肽的分子量分布2
1.2.4大豆肽的氨基酸組成分析2
1.2.5負(fù)氮平衡老年小鼠模型的制備2
1.2.6小鼠氮代謝的測定2
1.2.7小鼠血清蛋白含量的測定3
1.2.8金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)3
1.2.9小鼠分組與處理3
1.2.10小鼠免疫器官指數(shù)的測定3
1.2.11小鼠血清免疫球蛋白含量的測定4
1.2.12小鼠促炎性細(xì)胞因子含量的測定4
1.2.13小鼠血清趨化因子的測定4
1.3研究結(jié)果4
1.3.1大豆肽的SDS-PAGE分析4
1.3.2大豆肽的分子質(zhì)量分布4
1.3.3大豆肽的氨基酸分析5
1.3.4負(fù)氮平衡老年小鼠模型的構(gòu)建5
1.3.5大豆肽對小鼠免疫器官指數(shù)的影響6
1.3.6大豆肽對小鼠血清免疫球蛋白水平的影響7
1.3.7大豆肽對小鼠血清促炎性細(xì)胞因子水平的影響8
1.3.8大豆肽對小鼠血清趨化因子水平的影響9
1.4研究結(jié)論10
參考文獻(xiàn)10
第2章大豆肽對炎癥的預(yù)防作用 11
2.1引言11
2.1.1炎癥預(yù)防對人體健康的重要性11
2.1.2肽對炎癥預(yù)防作用的研究現(xiàn)狀11
2.1.3本章研究內(nèi)容與意義12
2.2研究方法12
2.2.1不同序列組成大豆肽的制備12
2.2.2蛋白含量測定12
2.2.3水解度測定13
2.2.4分子量測定13
2.2.5不同序列組成大豆肽質(zhì)譜測定13
2.2.6細(xì)胞培養(yǎng)13
2.2.7脂多糖誘導(dǎo)濃度選擇和肽預(yù)防濃度的選擇13
2.2.8不同酶解方案下大豆肽營養(yǎng)干預(yù)的保護(hù)作用13
2.2.9炎癥因子和趨化因子的測定13
2.2.10蛋白免疫印跡14
2.3研究結(jié)果14
2.3.1大豆蛋白在不同酶解工藝下的水解度分析14
2.3.2大豆分離蛋白在不同酶解工藝下的分子質(zhì)量分布分析14
2.3.3大豆分離蛋白在不同酶解工藝下所得大豆肽的序列組成差異15
2.3.4大豆分離蛋白在不同酶解工藝下所得大豆肽的序列特征差異16
2.3.5不同酶解方案下大豆肽對RAW264.7細(xì)胞的炎癥保護(hù)作用17
2.3.6不同酶解工藝下大豆肽序列特征差異對炎癥預(yù)防作用的影響18
2.4研究結(jié)論20
參考文獻(xiàn)21
第3章大豆肽對慢性焦慮的調(diào)控及作用機(jī)制 22
3.1引言22
3.1.1抗焦慮對人體健康的重要性22
3.1.2抗焦慮肽的研究現(xiàn)狀22
3.1.3本章研究內(nèi)容與意義23
3.2研究方法23
3.2.1小鼠飼料的制備23
3.2.2小鼠焦慮模型的構(gòu)建24
3.2.3小鼠的分組及處理24
3.2.4神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)25
3.2.5免疫組織化學(xué)25
3.2.6小鼠腦組織中神經(jīng)遞質(zhì)水平的測定25
3.2.7生化指標(biāo)的測定26
3.2.8蛋白質(zhì)印跡分析26
3.2.9小鼠血清代謝物的非靶代謝組學(xué)分析26
3.2.10實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR）27
3.2.11小鼠盲腸內(nèi)容物中腸道微生物分析27
3.2.12小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的測定27
3.3研究結(jié)果28
3.3.1大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠焦慮樣行為的影響28
3.3.2大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠海馬體神經(jīng)元興奮性的影響29
3.3.3大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠腦組織中神經(jīng)遞質(zhì)水平的影響29
3.3.4大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠海馬體小膠質(zhì)細(xì)胞的影響31
3.3.5大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠腦組織中炎癥因子水平的影響32
3.3.6大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠腦組織中BDNF水平及BDNF-TrkB-CREB通路的影響33
3.3.7大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠血清中HPA軸激素的影響34
3.3.8大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠血清中代謝物的影響34
3.3.9大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對皮質(zhì)酮合成分泌通路中基因表達(dá)的影響37
3.3.10大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠盲腸內(nèi)容物中腸道菌群的影響38
3.3.11大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對小鼠盲腸內(nèi)容物中短鏈脂肪酸的影響39
3.3.12相關(guān)性分析40
3.4研究結(jié)論42
參考文獻(xiàn)43
第4章大豆肽對睡眠的改善作用 45
4.1引言45
4.1.1睡眠對人體健康的重要性45
4.1.2肽對睡眠改善的研究現(xiàn)狀45
4.1.3本章研究內(nèi)容與意義46
4.2研究方法46
4.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物46
4.2.2果蠅的睡眠監(jiān)控46
4.2.3果蠅頭部RNA提取和實(shí)時(shí)熒光定量PCR47
4.2.4果蠅頭部GABA、5-HT、Glu和His的測量47
4.2.5戊巴比妥鈉誘發(fā)的睡眠試驗(yàn)47
4.2.6腦神經(jīng)遞質(zhì)含量的測定47
4.2.7蛋白質(zhì)印跡48
4.3研究結(jié)果48
4.3.1大豆肽對果蠅睡眠時(shí)長的影響48
4.3.2大豆肽對果蠅生物鐘基因的營養(yǎng)調(diào)節(jié)49
4.3.3大豆肽對果蠅睡眠調(diào)控相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)合成基因的營養(yǎng)調(diào)節(jié)49
4.3.4戊巴比妥鈉誘發(fā)的睡眠試驗(yàn)中大豆肽的作用50
4.3.5小鼠腦中神經(jīng)遞質(zhì)水平分析51
4.3.6大豆肽對TPH蛋白表達(dá)的影響53
4.3.7大豆肽對AANAT、MT1、MT2蛋白表達(dá)的影響53
4.4研究結(jié)論55
參考文獻(xiàn)55
第5章大豆肽改善血糖功能性 57
5.1引言57
5.1.1血糖功能性改善對人體健康的重要性57
5.1.2肽對血糖功能性改善的研究現(xiàn)狀57
5.1.3本章研究內(nèi)容與意義57
5.2大豆蛋白肽對正常條件胰腺B細(xì)胞功能的調(diào)控及作用機(jī)制58
5.2.1研究方法58
5.2.2研究結(jié)果60
5.2.3研究結(jié)論65
5.3大豆蛋白肽對高糖毒性條件下胰腺B細(xì)胞功能的調(diào)控及作用機(jī)制66
5.3.1研究方法66
5.3.2研究結(jié)果67
5.3.3研究結(jié)論75
參考文獻(xiàn)76
第6章大豆肽對預(yù)防和治療肌肉萎縮的作用 77
6.1引言77
6.1.1肌肉健康對人體健康的重要性77
6.1.2肽對預(yù)防和治療肌肉萎縮作用的研究內(nèi)容77
6.1.3本章研究內(nèi)容與意義77
6.2研究方法78
6.2.1動(dòng)物分組及灌胃設(shè)計(jì)78
6.2.2血清和肌肉樣品采集78
6.2.3血清相關(guān)指標(biāo)測定78
6.2.4總蛋白提取及蛋白定量78
6.2.5Western blotting分析79
6.3研究結(jié)果79
6.3.1大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠肌肉萎縮的預(yù)防作用79
6.3.2大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠肌肉萎縮的治療作用81
6.4結(jié)論84
參考文獻(xiàn)84
第7章大豆肽對傷口恢復(fù)的促進(jìn)作用 85
7.1引言85
7.1.1創(chuàng)傷對人體健康的危害85
7.1.2肽對傷口恢復(fù)促進(jìn)作用的研究現(xiàn)狀85
7.1.3本章研究內(nèi)容與意義85
7.2研究方法86
7.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理86
7.2.2背部全層皮膚創(chuàng)傷模型的建立86
7.2.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的營養(yǎng)干預(yù)86
7.2.4傷口觀察及測量86
7.2.5白細(xì)胞總數(shù)的測定87
7.2.6細(xì)胞因子的測定87
7.2.7大鼠血清蛋白含量的測定87
7.2.8組織病理學(xué)檢查87
7.3研究結(jié)果87
7.3.1大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠體重的影響87
7.3.2大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠血清蛋白濃度的影響87
7.3.3大鼠傷口恢復(fù)的宏觀觀察88
7.3.4大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠傷口恢復(fù)率的影響88
7.3.5大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠白細(xì)胞總數(shù)的影響89
7.3.6大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠細(xì)胞因子的影響89
7.3.7大豆肽營養(yǎng)干預(yù)對大鼠傷口皮膚組織病理結(jié)構(gòu)的影響90
7.4研究結(jié)論92
參考文獻(xiàn)93
第8章大豆肽通過改善內(nèi)皮細(xì)胞功能調(diào)節(jié)心血管疾病 94
8.1引言94
8.1.1內(nèi)皮功能改善對心血管健康的重要性94
8.1.2大豆肽對內(nèi)皮功能改善的研究現(xiàn)狀94
8.1.3本章研究內(nèi)容與意義96
8.2研究方法97
8.2.1細(xì)胞培養(yǎng)和大豆低聚肽處理細(xì)胞97
8.2.2細(xì)胞活力測定97
8.2.3內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子IL-6和IL-8的測定97
8.2.4細(xì)胞內(nèi)NO、MDA和SOD的測定97
8.2.5細(xì)胞中ROS的測定方法97
8.2.6細(xì)胞轉(zhuǎn)染98
8.2.7熒光定量PCR98
8.2.8蛋白質(zhì)免疫印跡檢測98
8.2.9數(shù)據(jù)處理與分析99
8.3研究結(jié)果99
8.3.1大豆低聚肽在正常生理模型下對內(nèi)皮功能的調(diào)節(jié)機(jī)制99
8.3.2大豆低聚肽在高血壓模型下對內(nèi)皮功能的調(diào)控102
8.3.3大豆低聚肽通過miRNAs調(diào)控內(nèi)皮功能作用機(jī)制106
8.4研究結(jié)論108
參考文獻(xiàn)108
第9章大豆肽對益生菌的調(diào)節(jié)作用 111
9.1引言111
9.1.1腸道益生菌對人體健康的重要性111
9.1.2肽對益生菌調(diào)控功能改善的研究現(xiàn)狀112
9.1.3研究內(nèi)容與意義114
9.2研究方法115
9.2.1大豆蛋白和大豆肽體外模擬胃腸消化樣品的制備115
9.2.2不同益生菌處理組的培養(yǎng)基成分115
9.2.3不同益生菌生長期的測定116
9.2.4鼠李糖乳桿菌短鏈脂肪酸的測定116
9.2.5羅伊氏乳桿菌DSM17938細(xì)胞培養(yǎng)116
9.2.6羅伊氏乳桿菌DSM17938黏附條件的測定117
9.2.7不同處理組羅伊氏乳桿菌DSM17938對HT-29細(xì)胞的黏附能力比較117
9.2.8羅伊氏乳桿菌DSM17938細(xì)胞毒性試驗(yàn)117
9.2.9dspe和dspr對HT-29細(xì)胞黏附能力的影響117
9.2.10觀察羅伊氏乳桿菌DSM17938對HT-29細(xì)胞的黏附118
9.2.11統(tǒng)計(jì)與分析118
9.3研究結(jié)果118
9.3.1不同益生菌生長期的測定118
9.3.2鼠李糖乳桿菌短鏈脂肪酸的測定120
9.3.3羅伊氏乳桿菌DSM17938黏附HT-29細(xì)胞的模型構(gòu)建122
9.3.4不同處理組羅伊氏乳桿菌DSM17938對HT-29細(xì)胞的黏附能力比較123
9.3.5dspe和dspr對HT-29細(xì)胞黏附能力的影響123
9.4研究結(jié)論124
9.4.1大豆蛋白和大豆肽及其消化產(chǎn)物對鼠李糖乳桿菌的影響124
9.4.2大豆蛋白和大豆肽及其消化產(chǎn)物對羅伊氏乳桿菌的影響125
參考文獻(xiàn)125
第10章大豆肽對熱損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究 127
10.1引言127
10.1.1熱應(yīng)激在運(yùn)動(dòng)中的不利影響127
10.1.2肽對熱損傷保護(hù)作用的研究現(xiàn)狀127
10.1.3本章研究內(nèi)容與意義127
10.2研究方法128
10.2.1大豆肽及其富硒化產(chǎn)物的制備及成分分析128
10.2.2大豆肽及其富硒化產(chǎn)物對大鼠熱損傷的保護(hù)作用129
10.3研究結(jié)果131
10.3.1大豆肽及其富硒化產(chǎn)物的制備及成分分析131
10.3.2大豆肽及其富硒化產(chǎn)物對大鼠熱損傷的保護(hù)作用133
10.4研究結(jié)論136
10.4.1大豆肽及其富硒化產(chǎn)物的制備及成分分析136
10.4.2大豆肽及其富硒化產(chǎn)物對大鼠熱損傷的保護(hù)作用136
參考文獻(xiàn)137
第11章大豆肽對肺部損傷的改善作用 138
11.1引言138
11.1.1肺部損傷對人體健康的危害138
11.1.2肽對肺部損傷改善作用的研究現(xiàn)狀138
11.1.3本章研究內(nèi)容與意義139
11.2研究方法139
11.2.1PM2.5溶液的配制139
11.2.2PM2.5誘導(dǎo)小鼠肺損傷模型的建立139
11.2.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理139
11.2.4肺泡灌洗液中蛋白含量的測定140
11.2.5BALF中白細(xì)胞組成測定140
11.2.6細(xì)胞因子的測定140
11.2.7小鼠血清蛋白含量的測定140
11.2.8組織病理學(xué)檢查141
11.2.9蛋白質(zhì)印跡分析測定141
11.3研究結(jié)果141
11.3.1大豆肽及富硒大豆肽對小鼠體重的影響141
11.3.2大豆肽及富硒大豆肽對小鼠肺組織病理結(jié)構(gòu)的影響141
11.3.3大豆肽及富硒大豆肽對小鼠BALF蛋白含量的影響142
11.3.4大豆肽及富硒大豆肽對小鼠BALF抗氧化能力的影響143
11.3.5大豆肽及富硒大豆肽對小鼠BALF中白細(xì)胞的影響143
11.3.6大豆肽及富硒大豆肽對小鼠促炎性細(xì)胞因子水平的影響144
11.3.7大豆肽及富硒大豆肽對小鼠肺組織TLR4/NF-κB/IκBα信號通路蛋白表達(dá)的影響144
11.3.8大豆肽及富硒大豆肽對小鼠肺組織NLRP3-Caspase-1信號通路蛋白表達(dá)的影響145
11.4研究結(jié)論146
參考文獻(xiàn)147
第12章大豆肽鈣螯合作用及促鈣吸收 148
12.1引言148
12.1.1保證正常鈣攝入量對人體健康的重要性148
12.1.2肽調(diào)節(jié)鈣攝入量的研究現(xiàn)狀148
12.1.3本章的研究內(nèi)容與意義148
12.2研究方法149
12.2.1高鈣結(jié)合能力大豆肽構(gòu)效關(guān)系149
12.2.2高鈣結(jié)合大豆肽-鈣螯合物促鈣吸收機(jī)理研究150
12.3研究結(jié)果152
12.3.1高鈣結(jié)合能力大豆肽構(gòu)效關(guān)系152
12.3.2高鈣結(jié)合大豆肽-鈣螯合物促鈣吸收機(jī)理研究157
12.4主要結(jié)論163
參考文獻(xiàn)163