動(dòng)物病毒樣顆粒技術(shù)

目錄
第一章緒論1
第一節(jié)病毒樣顆粒的概念及特點(diǎn)1
一、病毒樣顆粒的概念1
二、病毒樣顆粒的特點(diǎn)及優(yōu)勢1
三、病毒樣顆粒的不足2
第二節(jié)病毒樣顆粒的分類3
第三節(jié)病毒樣顆粒的發(fā)展歷程3
一、病毒樣顆粒技術(shù)的進(jìn)展3
二、病毒樣顆粒相關(guān)表達(dá)系統(tǒng)的發(fā)展4
三、病毒樣顆粒組裝技術(shù)的發(fā)展5
參考文獻(xiàn)6
第二章桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)9
第一節(jié)概述9
一、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)9
二、桿狀病毒載體9
三、宿主11
四、外源基因的表達(dá)13
第二節(jié)桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)技術(shù)13
一、桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的發(fā)展13
二、高效表達(dá)策略15
第三節(jié)Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的VLP制備17
一、載體的選擇17
二、目的基因的克隆21
三、培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞21
四、重組bacmid的構(gòu)建21
五、使用PCR分析重組質(zhì)粒22
六、VLP的制備23
第四節(jié)桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在VLP研究中的進(jìn)展24
一、無囊膜病毒26
二、囊膜病毒28
三、瓶頸和問題30
四、展望34
五、附錄34
參考文獻(xiàn)41
第三章酵母表達(dá)系統(tǒng)44
第一節(jié)概述44
一、酵母表達(dá)系統(tǒng)簡介44
二、常用酵母表達(dá)系統(tǒng)分類47
第二節(jié)酵母表達(dá)技術(shù)55
一、酵母表達(dá)技術(shù)概述55
二、酵母表達(dá)技術(shù)的高效表達(dá)策略56
第三節(jié)酵母表達(dá)系統(tǒng)在VLP研究中的進(jìn)展61
一、概述61
二、酵母表達(dá)系統(tǒng)在人源病毒VLP中的研究62
三、酵母表達(dá)系統(tǒng)在動(dòng)物病毒VLP中的研究65
第四節(jié)展望68
參考文獻(xiàn)69
第四章活病毒載體表達(dá)系統(tǒng)74
第一節(jié)痘病毒表達(dá)系統(tǒng)74
一、痘病毒的分類74
二、痘病毒基因組特點(diǎn)74
三、痘病毒表達(dá)載體及其應(yīng)用75
第二節(jié)腺病毒表達(dá)系統(tǒng)80
一、腺病毒生物學(xué)特點(diǎn)80
二、腺病毒的分類81
三、腺病毒感染及免疫應(yīng)答機(jī)制83
四、重組腺病毒的構(gòu)建85
五、腺病毒表達(dá)系統(tǒng)在VLP研究中的進(jìn)展85
第三節(jié)腺相關(guān)病毒表達(dá)系統(tǒng)86
一、腺相關(guān)病毒病原學(xué)特點(diǎn)87
二、腺相關(guān)病毒衣殼組裝87
三、腺相關(guān)病毒誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答88
四、重組腺相關(guān)病毒制備89
五、腺相關(guān)病毒遞送系統(tǒng)的應(yīng)用92
六、腺相關(guān)病毒遞送系統(tǒng)發(fā)展展望94
第四節(jié)慢病毒表達(dá)系統(tǒng)94
一、慢病毒表達(dá)系統(tǒng)概述95
二、重組慢病毒制備與生產(chǎn)97
三、慢病毒表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用101
四、慢病毒載體系統(tǒng)發(fā)展展望103
五、附錄103
參考文獻(xiàn)105
第五章哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)108
第一節(jié)CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)108
一、CHO細(xì)胞表達(dá)載體特征111
二、宿主細(xì)胞的優(yōu)化113
三、真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染技術(shù)113
四、哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件115
五、CHO制備VLP研究的進(jìn)展116
第二節(jié)HEK293細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)119
一、HEK293細(xì)胞系發(fā)展歷史119
二、HEK293細(xì)胞表達(dá)載體特征121
三、HEK293生產(chǎn)蛋白質(zhì)制劑的優(yōu)點(diǎn)122
四、HEK293真核表達(dá)載體的轉(zhuǎn)染123
五、HEK293細(xì)胞制備VLP的研究進(jìn)展123
第三節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)工藝研究129
一、細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的控制129
二、生物反應(yīng)器130
三、動(dòng)物細(xì)胞流加培養(yǎng)工藝131
四、流加培養(yǎng)的細(xì)胞代謝及其基因調(diào)控132
第四節(jié)穩(wěn)定表達(dá)重組蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系133
一、利用綠色熒光蛋白（GFP）構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系134
二、利用慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系135
三、利用噬菌體φC31整合酶構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系135
四、利用轉(zhuǎn)座子構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系136
五、問題136
第五節(jié)展望136
參考文獻(xiàn)137
第六章植物表達(dá)系統(tǒng)140
第一節(jié)植物表達(dá)系統(tǒng)概述140
一、植物表達(dá)系統(tǒng)的組成140
二、植物表達(dá)系統(tǒng)種類142
第二節(jié)植物表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)技術(shù)143
一、植物表達(dá)系統(tǒng)常用載體及工程菌株143
二、提高目的蛋白表達(dá)水平的手段146
三、植物表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)重組蛋白純化工藝149
第三節(jié)植物表達(dá)系統(tǒng)在VLP中的研究進(jìn)展151
一、囊膜病毒153
二、無囊膜病毒159
第四節(jié)展望162
參考文獻(xiàn)163
第七章原核表達(dá)系統(tǒng)166
第一節(jié)大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)概述及技術(shù)166
一、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的組成166
二、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)高效表達(dá)的策略169
三、VLP在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)與組裝173
第二節(jié)其他原核表達(dá)系統(tǒng)（乳酸菌、鏈霉菌）概述及技術(shù)174
一、乳酸菌175
二、鏈霉菌179
第三節(jié)原核表達(dá)系統(tǒng)在VLP中的研究進(jìn)展181
一、囊膜病毒181
二、無囊膜病毒184
第四節(jié)展望189
參考文獻(xiàn)190
第八章無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)195
第一節(jié)無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)發(fā)展史195
第二節(jié)無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)和不足197
一、CFPS的優(yōu)點(diǎn)197
二、CFPS存在的問題197
第三節(jié)無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)分類及研究進(jìn)展198
一、細(xì)胞提取物來源CFPS199
二、“PURE”系統(tǒng)CFPS203
三、CFPS的生產(chǎn)方式204
第四節(jié)CFPS的主要應(yīng)用領(lǐng)域205
一、特殊蛋白質(zhì)的合成205
二、蛋白質(zhì)高通量表達(dá)和篩選206
三、合成藥物207
第五節(jié)CFPS在VLP制備中的研究進(jìn)展207
一、無囊膜病毒207
二、囊膜病毒209
第六節(jié)展望212
參考文獻(xiàn)212
第九章病毒樣顆粒的表征技術(shù)215
第一節(jié)概述215
第二節(jié)生物化學(xué)分析技術(shù)216
一、MS技術(shù)216
二、SDS-PAGE技術(shù)218
三、RP-HPLC技術(shù)219
第三節(jié)生物物理學(xué)分析技術(shù)220
一、TEM220
二、Cryo-EM221
三、AFM222
四、DLS技術(shù)224
五、圓盤離心技術(shù)225
六、ES-DMA技術(shù)226
七、AF4技術(shù)227
八、Native-PAGE技術(shù)229
九、密度梯度離心技術(shù)229
十、AUC技術(shù)232
第四節(jié)免疫生物學(xué)分析技術(shù)234
一、ELISA技術(shù)234
二、SPR技術(shù)235
參考文獻(xiàn)237
第十章動(dòng)物病毒樣顆粒疫苗241
第一節(jié)VLP疫苗概述241
一、VLP疫苗的優(yōu)勢241
二、VLP疫苗的多樣性242
三、VLP疫苗的應(yīng)用246
四、VLP疫苗的分類249
五、展望251
第二節(jié)VLP的免疫機(jī)制251
一、抗原呈遞細(xì)胞的種類、功能251
二、抗原呈遞細(xì)胞在VLP疫苗免疫中的作用254
三、B細(xì)胞及VLP誘導(dǎo)的B細(xì)胞免疫應(yīng)答255
四、主要組織相容性復(fù)合體257
五、抗原呈遞途徑258
六、T細(xì)胞及VLP誘導(dǎo)的T細(xì)胞免疫應(yīng)答259
第三節(jié)VLP疫苗的研究261
一、人類與人畜共患病VLP疫苗262
二、豬的VLP疫苗274
三、反芻動(dòng)物的VLP疫苗279
四、禽類的VLP疫苗282
五、兔、魚、犬、貂和貓的VLP疫苗287
參考文獻(xiàn)292
第十一章病毒及病毒樣顆粒作為納米藥物遞送載體305
第一節(jié)納米藥物遞送系統(tǒng)概述305
一、納米藥物遞送系統(tǒng)305
二、常見納米藥物遞送載體的分類及特性311
三、病毒及病毒樣顆粒類納米藥物遞送載體314
第二節(jié)病毒及病毒樣顆粒承載藥物的機(jī)制和原理316
一、從材料學(xué)與化學(xué)的角度看VNP/VLP316
二、VNP/VLP的解離-自組裝特性317
三、物理吸附法317
四、化學(xué)修飾法318
第三節(jié)病毒及病毒樣顆粒作為納米藥物遞送載體的研究進(jìn)展322
一、植物VNP/VLP作為納米藥物遞送載體322
二、人/動(dòng)物VNP/VLP作為納米藥物遞送載體334
三、噬菌體VNP/VLP作為納米藥物遞送載體340
四、展望345
參考文獻(xiàn)345
第十二章病毒樣顆粒作為核酸的遞送載體348
第一節(jié)核酸類藥物簡介348
一、核酸類藥物與基因治療348
二、核酸類藥物的現(xiàn)狀和前景349
三、核酸類藥物遞送載體研究現(xiàn)狀350
四、病毒樣顆粒作為核酸類藥物遞送載體352
第二節(jié)病毒樣顆粒遞送核酸的機(jī)理和方法353
一、病毒樣顆粒遞送核酸的機(jī)理353
二、病毒樣顆粒遞送核酸的方法356
第三節(jié)病毒樣顆粒遞送DNA的研究進(jìn)展357
一、病毒樣顆粒遞送DNA的研究358
二、病毒樣顆粒遞送DNA在人類病毒中的應(yīng)用360
第四節(jié)病毒樣顆粒遞送RNA的研究進(jìn)展365
一、病毒樣顆粒遞送RNA在人和動(dòng)物中的應(yīng)用365
二、病毒樣顆粒遞送RNA在植物中的應(yīng)用367
三、病毒樣顆粒遞送基因短片段的研究367
第五節(jié)展望與不足371
參考文獻(xiàn)372
第十三章病毒及病毒樣顆粒作為新型功能納米元/器件375
第一節(jié)病毒及病毒樣顆粒與量子點(diǎn)375
一、量子點(diǎn)概述375
二、病毒及病毒樣顆粒-量子點(diǎn)復(fù)合物378
三、病毒及病毒樣顆粒-量子點(diǎn)復(fù)合物的研究進(jìn)展379
第二節(jié)病毒及病毒樣顆粒與金納米顆粒385
一、金納米顆粒概述385
二、病毒及病毒樣顆粒-金納米顆粒復(fù)合物的研究進(jìn)展385
第三節(jié)病毒及病毒樣顆粒在磁共振成像中的應(yīng)用394
一、磁共振成像概述394
二、VNP/VLP與T1造影劑397
三、VNP/VLP與T2造影劑400
第四節(jié)病毒樣顆粒與多模態(tài)成像404
一、多模態(tài)成像概述404
二、VNP/VLP在多模態(tài)成像中的應(yīng)用406
三、展望410
參考文獻(xiàn)410
第十四章病毒樣顆粒在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用413
第一節(jié)病毒樣顆粒的結(jié)構(gòu)解析413
一、戊型肝炎病毒樣顆粒的結(jié)構(gòu)413
二、尼帕病毒樣顆粒的結(jié)構(gòu)415
三、β-諾達(dá)病毒樣顆粒的結(jié)構(gòu)416
四、豬圓環(huán)病毒樣顆粒的結(jié)構(gòu)418
五、柯薩奇B3病毒樣顆粒的結(jié)構(gòu)419
六、展望420
第二節(jié)病毒樣顆粒的組裝機(jī)制研究421
一、靜電作用力421
二、滲透壓422
三、核酸片段423
四、溫度和pH425
五、熱休克蛋白426
六、谷胱甘肽426
七、展望427
第三節(jié)病毒樣顆粒模擬病毒的研究427
一、病毒樣顆粒模擬病毒的生命周期428
二、病毒樣顆粒模擬病毒的組織嗜性429
三、病毒樣顆粒模擬病毒活化免疫應(yīng)答430
四、展望433
參考文獻(xiàn)433