高寒草原牧草根際促生菌資源篩選及促生機(jī)理研究

1 緒論1
1.1 研究背景1
1.1.1研究區(qū)概況1
1.1.2研究的目的與意義3
1.1.3研究內(nèi)容與技術(shù)路線5
1.2植物根際促生菌（PGPR）的國內(nèi)外研究現(xiàn)狀7
1.2.1PGPR的概念及種類7
1.2.2PGPR的促生特性8
1.2.3PGPR菌株對(duì)植物的促生作用17
1.2.4溶磷微生物溶磷機(jī)理研究19
2 植物根際土壤理化性質(zhì)和細(xì)菌數(shù)量及分布特征的研究23
2.1材料與方法24
2.1.1樣地概況24
2.1.2樣品采集24
2.1.3植物根際土壤理化性質(zhì)測(cè)定25
2.1.4植物根際細(xì)菌數(shù)量測(cè)定25
2.1.5數(shù)據(jù)處理27
2.2結(jié)果與分析27
2.2.1植物根際土壤理化特征27
2.2.2植物根際土壤細(xì)菌的數(shù)量及分布29
2.2.3植物根際土壤養(yǎng)分含量對(duì)根際細(xì)菌數(shù)量的影響30
2.3討論31
2.4小結(jié)32
3 植物根際PGPR菌株的分離與純化33
3.1材料與方法34
3.1.1材料34
3.1.2培養(yǎng)基34
3.1.3固氮菌的分離與純化36
3.1.4溶磷菌的分離與純化36
3.1.5數(shù)據(jù)處理36
3.2結(jié)果與分析37
3.2.1植物根際固氮菌的數(shù)量及分布37
3.2.2植物根際溶解無機(jī)磷菌株的數(shù)量及分布37
3.2.3植物根際溶解有機(jī)磷菌株的數(shù)量及分布38
3.2.4植物根際PGPR菌株的分布38
3.3討論39
3.4小結(jié)40
4 優(yōu)良PGPR菌株的篩選及促生特性研究41
4.1材料與方法42
4.1.1供試菌株42
4.1.2 PGPR菌株促生特性研究42
4.1.3 優(yōu)良PGPR菌株的保藏48
4.1.4數(shù)據(jù)處理48
4.2結(jié)果與分析48
4.2.1PGPR菌株的固氮酶活性48
4.2.2PGPR菌株的溶磷能力50
4.2.3PGPR菌株的分泌 IAA 特性54
4.2.4優(yōu)良PGPR菌株的特點(diǎn)56
4.3討論57
4.4小結(jié)60
5 優(yōu)良PGPR菌株的鑒定61
5.1材料與方法62
5.1.1供試菌株62
5.1.2菌株菌落特征的觀察62
5.1.3菌株的革蘭氏染色63
5.1.4菌株的16S rDNA鑒定63
5.1.5 數(shù)據(jù)處理65
5.2結(jié)果與分析66
5.2.1優(yōu)良PGPR菌株的菌落形態(tài)特征66
5.2.2優(yōu)良PGPR菌株的革蘭氏染色66
5.2.3優(yōu)良PGPR菌株16S rDNA的PCR擴(kuò)增67
5.2.4優(yōu)良PGPR菌株16S rDNA 序列測(cè)定68
5.2.5優(yōu)良PGPR菌株16S rDNA 序列比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化樹的繪制68
5.3討論73
5.4小結(jié)74
6 PGPR菌株植物根際定殖能力及接種效應(yīng)研究75
6.1材料與方法76
6.1.1供試菌株76
6.1.2供試植物76
6.1.3接菌劑的制備及質(zhì)量檢測(cè)77
6.1.4優(yōu)良PGPR菌株接種效應(yīng)研究77
6.1.5優(yōu)良PGPR菌株植物根際定殖能力研究80
6.1.6數(shù)據(jù)處理81
6.2結(jié)果與分析81
6.2.1PGPR接菌劑質(zhì)量檢測(cè)81
6.2.2PGPR接菌劑的試管接種效應(yīng)82
6.2.3PGPR接菌劑盆栽接種效應(yīng)93
6.2.4PGPR菌株在披堿草根際的定殖能力97
6.3討論98
6.4小結(jié)99
7 優(yōu)良溶磷菌溶磷機(jī)理的研究102
7.1材料與方法103
7.1.1供試菌株103
7.1.2培養(yǎng)基103
7.1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)104
7.1.4菌株溶磷動(dòng)態(tài)測(cè)定104
7.1.5菌株培養(yǎng)液pH值測(cè)定105
7.1.6菌株培養(yǎng)液蔗糖酶活性測(cè)定105
7.1.7菌株培養(yǎng)液磷酸酶活性測(cè)定106
7.1.8菌株培養(yǎng)液有機(jī)酸種類及含量的測(cè)定107
7.1.9數(shù)據(jù)處理108
7.2結(jié)果與分析108
7.2.1菌株溶磷動(dòng)態(tài)108
7.2.2溶磷量與菌株培養(yǎng)液pH值的相關(guān)性110
7.2.3溶磷量與菌株培養(yǎng)液蔗糖酶活性的相關(guān)性112
7.2.4溶磷量與菌株培養(yǎng)液磷酸酶活性的相關(guān)性115
7.2.5菌株培養(yǎng)液有機(jī)酸的種類及含量116
7.2.6菌株溶磷途徑的綜合分析121
7.3討論122
7.4小結(jié)125
8 結(jié)論與展望
8.1主要結(jié)論127
8.2創(chuàng)新點(diǎn)130
8.3存在問題131
8.4研究展望131
附錄 部分PGPR珠菌16S rDNA堿基序列133
參考文獻(xiàn)150