生物化學與分子生物學實驗

第一篇 基本技能訓練
第一章 實驗室規(guī)則
一、學生實驗守則
二、實驗室安全防護知識
三、實驗室滅火法
第二章 玻璃儀器的洗滌
一、生物化學與分子生物學實驗常用玻璃儀器
二、實驗室常用的洗滌方法
三、常用玻璃儀器的洗滌
四、玻璃器皿的干燥
第三章 常用容量器的正確使用
一、吸管
二、微量移液器
三、容量瓶
四、滴定管
五、量筒
第四章 試劑的配制
一、溶液濃度的表示及配制
二、溶液濃度的調(diào)整
三、試劑配制中的注意事項
第五章 制備生命大分子物質(zhì)的基本操作
一、實驗材料的選擇和處理
二、細胞的破碎
三、有效成分的提取
四、振蕩與攪拌
五、離心
六、沉淀的過濾與洗滌
七、生命大分子物質(zhì)的濃縮
八、生命大分子物質(zhì)的冷凍干燥
第六章 實驗誤差和數(shù)據(jù)處理
一、實驗誤差
二、數(shù)據(jù)處理
第七章 實驗記錄、實驗報告及考評方式
一、實驗記錄
二、實驗報告
三、考核方式與評分方法
第二篇 生物化學實驗
第八章 生物化學基礎(chǔ)實驗
實驗一 硅膠G薄層層析法分離鑒定糖類
實驗二植物水溶性總糖的提取和含量測定（蒽酮比色法）
實驗三 脂肪碘值的測定
實驗四 磷硫鐵法測定血清總膽固醇含量
實驗五 甲醛滴定法測定氨基氮
實驗六 紙層析法分離鑒定氨基酸
實驗七 蛋白質(zhì)兩性性質(zhì)與等電點的測定
實驗八 蛋白質(zhì)的沉淀、變性反應
實驗九 蛋白質(zhì)含量的測定（雙縮脲法）
實驗十 蛋白質(zhì)含量的測定（F0lin一酚法）
實驗十一 蛋白質(zhì)含量的測定（考馬斯亮藍法）
實驗十二 酶的特異性
實驗十三 酶促反應動力學
實驗十四 動物肝臟DNA的提取
實驗十五 二苯胺定糖法測定DNA含量
實驗十六 定磷法測定RNA含量
實驗十七 2，6一二氯酚靛酚法測定維生素C含量
第九章 生物化學強化實驗
實驗十八 3，5一二硝基水楊酸比色定糖法
實驗十九 粗脂肪的提取及含量的測定
實驗二十 酪蛋白的制備及含量的測定
實驗二十一 蛋白質(zhì)含量的測定（微量凱氏定氮法）
實驗二十二 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳
實驗二十三 蛋白質(zhì)的分級鹽析及凝膠過濾法脫鹽
實驗二十四 瓊脂糖凝膠電泳分離乳酸脫氫酶同功酶
實驗二十五 薄層層析法鑒定轉(zhuǎn)氨酶的轉(zhuǎn)氨基作用
實驗二十六 熒光分光光度法測定維生素B：的含量
第十章 生物化學綜合實驗
實驗二十七 卵磷脂的制備及氣相色譜分析
實驗二十八 大豆蛋白的提取、含量測定及氨基酸組成分析
實驗二十九 雞卵類粘蛋白的分離與純化
實驗三十 細胞色素C的制備及測定
實驗三十一 SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗三十二 凝膠過濾層析法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗三十三 親和層析法純化胰蛋白酶
實驗三十四 高效液相色譜法測定雌激素含量
實驗三十五 離子交換柱層析分離核苷酸
實驗三十六 旋光法測定淀粉含量
第三篇 分子生物學實驗
第十一章 分子生物學基礎(chǔ)實驗
實驗一 堿變性法提取質(zhì)粒DNA及純化
實驗二 質(zhì)粒DNA的限制內(nèi)切酶酶切及瓊脂糖凝膠電泳分析
實驗三 脈沖電泳技術(shù)
實驗四 A噬菌體感染與效價測定
實驗五 提取純化大腸桿菌基因組DNA
實驗六 哺乳動物mRNA的分離及純化
第十二章 分子生物學綜合實驗
實驗七 Western Blotting
實驗八 DNA重組和轉(zhuǎn)化
實驗九 大腸細菌的基因芯片鑒定
實驗十 DNA的Southern雜交
實驗十一 生物系統(tǒng)學研究中的RAPD技術(shù)
第四篇 創(chuàng)新設(shè)計項目
第十三章 生物化學與分子生物學創(chuàng)新設(shè)計項目
一、實驗目的
二、基本要求
三、結(jié)果處理
四、選題范圍
附錄
一、生物化學與分子生物學實驗常用儀器的使用方法
（一）分光光度計
（二）離心機
（三）電泳儀
（四）PCR儀
（五）凝膠成像系統(tǒng)
（六）恒溫水浴鍋
（七）酸度計
（八）恒溫振蕩培養(yǎng)箱
（九）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀
（十）高效液相色譜儀
（十一）核酸蛋白檢測系統(tǒng)
（十二）超凈工作臺
（十三）高壓滅菌鍋
二、常用緩沖溶液的配制
（一）甘氨酸一鹽酸緩沖液
（二）氯化鉀一鹽酸緩沖液
（三）鄰苯二甲酸氫鉀一鹽酸緩沖液
（四）醋酸一醋酸鈉緩沖液
（五）鄰苯二甲酸氫鉀一氫氧化鈉緩沖液
（六）檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液
（七）磷酸二氫鉀一氫氧化鈉緩沖液
（八）磷酸氫二鈉一檸檬酸緩沖液
（九）磷酸氫二鈉一磷酸二氫鈉緩沖液
（十）巴比妥一鹽酸緩沖液
（十一）Tris一鹽酸緩沖液
（十二）硼酸一硼砂緩沖液
（十三）硼砂緩沖液
（十四）甘氨酸一氫氧化鈉緩沖液
（十五）碳酸鈉一碳酸氫鈉緩沖液
（十六）酸度計常用標準緩沖溶液的配制
三、層析法常用數(shù)據(jù)表
（一）凝膠過濾用相對分子質(zhì)量標準品
（二）瓊脂糖凝膠技術(shù)數(shù)據(jù)
（三）SephadexG型交聯(lián)葡聚糖凝膠的數(shù)據(jù)
（四）SephadexG型交聯(lián)葡聚糖凝膠溶脹所需時間
（五）聚丙烯酰胺凝膠技術(shù)數(shù)據(jù)
（六）層析介質(zhì)的選擇
（七）薄層層析分離各類物質(zhì)常用的展層溶劑
四、硫酸銨飽和度常用表
（一）不同溫度下飽和硫酸銨溶液的數(shù)據(jù)
（二）調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計算表（0℃）
（三）調(diào)整硫酸銨溶液飽和度計算表（25℃）
五、細菌培養(yǎng)基、抗生素
（一）LB培養(yǎng)基配制方法
（二）NZCYM培養(yǎng)基配制方法
（三）NZYM培養(yǎng)基配制方法
（四）高濃度肉湯配制方法
（五）SOB培養(yǎng)基配制方法
（六）M9培養(yǎng)基
（七）2×YT培養(yǎng)基
（八）固體培養(yǎng)基
（九）常用抗生素溶液