環(huán)境工程微生物學實驗

環(huán)境工程微生物學實驗須知1
第一章環(huán)境工程微生物學基本實驗技術(shù)2
第一節(jié)準備實驗——接種工具與瓶塞及其使用2
一、接種工具2
二、瓶塞（過濾塞）4
第二節(jié)常用器皿及其包裝5
一、常用玻璃器皿的種類、規(guī)格及使用5
實驗1?1常用玻璃器皿的清洗和包裝15
二、環(huán)境工程微生物學實驗常用設備及使用17
第三節(jié)培養(yǎng)基及其配制22
一、培養(yǎng)基的種類22
二、培養(yǎng)基的配制24
實驗1?2培養(yǎng)基的配制25
第四節(jié)消毒與滅菌技術(shù)27
一、濕熱滅菌27
二、干熱滅菌29
三、紫外滅菌29
四、過濾除菌29
實驗1?3消毒與滅菌31
第五節(jié)接種與無菌操作技術(shù)33
一、接種概念33
二、無菌操作的概念33
三、接種與無菌操作的基本要求33
四、接種前的具體準備34
五、接種方法34
六、思考題37
第六節(jié)環(huán)境工程微生物的分離與純化技術(shù)37
一、控制培養(yǎng)條件的方法37
二、菌落水平上的分離與純化38
實驗1?4純種分離40
三、細胞水平上的分離與純化42
第七節(jié)菌落形態(tài)觀察與計數(shù)43
一、細菌和酵母菌菌落的異同點44
二、放線菌和霉菌菌落形態(tài)的異同點44
實驗1?5微生物培養(yǎng)特征的觀察45
第八節(jié)環(huán)境工程微生物顯微技術(shù)46
一、普通光學顯微鏡47
實驗1?6微生物形態(tài)的觀察52
實驗1?7顯微鏡直接計數(shù)與微生物懸滴觀察53
實驗1?8微生物細胞大小的測定55
二、暗視野顯微鏡57
實驗1?9暗視野顯微鏡的使用及活菌體的觀察58
三、相差顯微鏡59
實驗1?10相差顯微鏡的使用及微生物（酵母）細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察60
四、熒光顯微鏡61
實驗1?11熒光顯微鏡的使用及微生物（酵母和細菌）形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察63
五、透射電子顯微鏡63
實驗1?12透射電子顯微鏡微生物樣品的制備與觀察66
六、掃描電子顯微鏡69
實驗1?13掃描電子顯微鏡微生物樣品的制備與觀察71
第九節(jié)微生物的制片與染色技術(shù)73
一、微生物制片技術(shù)73
二、微生物的染色技術(shù)74
三、細菌和放線菌的制片與簡單染色技術(shù)76
實驗1?14細菌和放線菌的制片、簡單染色與形態(tài)觀察76
實驗1?15細菌莢膜、芽孢和鞭毛的制片、簡單染色與形態(tài)觀察77
四、霉菌和酵母菌的制片與簡單染色技術(shù)79
實驗1?16酵母菌和霉菌的制片、染色技術(shù)及形態(tài)觀察79
實驗1?17革蘭染色80
第二章綜合實驗環(huán)境工程微生物的群體生長特性與培養(yǎng)技術(shù)83
實驗2?1微生物生長曲線的制作（光電比濁計數(shù)法測定）83
實驗2?2環(huán)境因素（pH、溫度、滲透壓、化學藥物等）對微生物生長的影響85
實驗2?3好氧微生物的培養(yǎng)90
實驗2?4厭氧微生物的培養(yǎng)93
實驗2?5病毒（噬菌體）的培養(yǎng)96
第三章研究性實驗污染物降解菌的分離與活性測定技術(shù)100
實驗3?1酚降解菌的分離與降解活性的測定100
實驗3?2有機磷降解菌的分離與降解活性的測定102
實驗3?3纖維素降解菌（產(chǎn)纖維素酶細菌）的分離與降解活性的測定104
實驗3?4淀粉降解菌（產(chǎn)淀粉酶細菌）的分離與降解活性的測定107
實驗3?5蛋白質(zhì)降解菌（產(chǎn)蛋白酶細菌）的分離與降解活性的測定109
實驗3?6石油降解菌的分離與降解活性的測定111
實驗3?7氰化物降解菌的分離與降解活性的測定113
實驗3?8硝化細菌的分離與硝化活性的測定116
實驗3?9氨化細菌的分離與活性的測定119
實驗3?10聚磷菌的分離與活性測定121
第四章環(huán)境工程微生物學應用研究型實驗125
實驗4?1微生物產(chǎn)沼氣125
實驗4?2微生物制氫129
實驗4?3微生物制取酒精（酵母菌的乙醇發(fā)酵試驗）132
實驗4?4微生物吸附劑的制備136
實驗4?5水中大腸菌群數(shù)的測定138
實驗4?6利用Biolog自動分析系統(tǒng)分
離鑒定微生物菌群142
第五章環(huán)境工程微生物學現(xiàn)代分子實驗技術(shù)146
實驗5?1擴增片段長度多態(tài)性分析（AFLP）146
實驗5?2限制性片段長度多態(tài)性分析（RFLP）150
實驗5?3隨機引物擴增多態(tài)性DNA分析（RAPD）151
實驗5?4聚合酶鏈反應（PCR）154
知識拓展環(huán)境工程微生物菌種的保藏156
附錄一常用培養(yǎng)基的配方161
附錄二常用試劑和溶液的配制166
附錄三常用染色液的配制170
附錄四菌種保藏技術(shù)172
參考文獻173