轉基因動物技術

第一章 概述
第一節(jié) 轉基因動物技術的基本原理
一、轉基因的細胞學原理
二、轉基因的胚胎學原理
三、轉基因的分子生物學原理
第二節(jié) 轉基因動物技術要點
一、轉基因方法
二、轉基因的類型與在個體中的作用
三、轉基因動物制備方法
四、轉基因的表達特征及提高轉基因表達的策略
第三節(jié) 轉基因動物技術的應用
一、應用
二、問題及對策
參考文獻
第二章 實驗動物的飼養(yǎng)與培育
第一節(jié) 實驗動物的分類
一、在動物學上的分類
二、按遺傳學控制原理分類
三、按微生物學控制原理分類
第二節(jié) 實驗動物的飼養(yǎng)條件與環(huán)境控制
一、影響實驗動物環(huán)境的因素及其控制
二、實驗動物的房舍設施
三、實驗動物飼養(yǎng)的輔助設施和設備
四、實驗動物環(huán)境監(jiān)測和設施的維護
第三節(jié) 實驗動物的營養(yǎng)與飼料
一、動物營養(yǎng)需要
二、各種實驗動物的營養(yǎng)需要
三、飼養(yǎng)標準與飼料標準
四、飼料的營養(yǎng)成分及其作用
第四節(jié) 實驗動物的育種
一、近交系的培育
二、封閉群的培育
三、雜交群的培育
四、特殊性狀動物的培育
五、野生動物的實驗動物化
參考文獻
第三章 基因表達的調控
第一節(jié) 染色體的結構
一、原核生物染色體的基本結構
二、真核生物染色質的基本結構
三、真核生物染色體的結構模型
第二節(jié) 原核生物基因表達的調控
一、原核生物DNA水平的調控
二、原核生物的操縱子調控
三、原核生物翻譯水平的調控
四、原核生物基因表達的時序調控
五、環(huán)境條件對原核生物基因表達的調控
第三節(jié) 真核生物基因表達的調控
一、真核生物DNA水平的基因表達調控
二、真核生物轉錄水平的基因表達調控
三、真核生物轉錄后水平的基因表達調控
四、真核生物翻譯水平的基因表達調控
五、真核生物翻譯后水平的基因表達調控
參考文獻
第四章 轉基因的制備及導入宿主動物
第一節(jié) 目的基因的獲取
一、目的基因的來源
二、目的基因的分離
第二節(jié) 常用載體
一、質粒（plasmid）
二、噬菌體載體（bacteriophage vector）
三、柯斯質粒（cosmid）
四、人工染色體
五、動物病毒載體
六、染色體定位整合載體
七、幾種特殊的表達載體
第三節(jié) DNA重組
一、工具酶
二、目的基因DNA片段與載體的連接方法
三、重組DNA導入受體細胞
四、重組體的選擇和篩選
第四節(jié) 外源基因導入宿主動物細胞的方法
一、磷酸鈣轉染技術
二、二乙氨乙基葡聚糖轉染技術
三、聚陽離子-DMSO轉染技術
四、顯微注射技術
五、電穿孔法
六、脂質體栽體法
七、反轉錄病毒載體法
八、胚胎干細胞法
九、精子載體法
參考文獻
第五章 基因的定位打靶及條件打靶
第一節(jié) 基因打靶的載體和策略
一、基因打靶的載體
二、基因打靶的策略
第二節(jié) 基因的定位打靶
一、定位打靶載體的構建
二、胚胎干細胞的培養(yǎng)和電轉
三、陽性ES細胞克隆的篩選
四、陽性ES細胞轉入胚胎
五、嵌合體小鼠的鑒定和維持
六、影響中靶效率的因素
第三節(jié) 基因的條件打靶
一、條件性基因打靶的概念和原理
二、表達各種可控的重組酶轉基因鼠是發(fā)生條件打靶的關鍵
三、條件基因打靶技術基本策略
第四節(jié) 基因打靶技術的改進和應用前景
一、重組工程系統(tǒng)使得構建基因打靶載體更方便、快捷
二、位點特異性重組酶系統(tǒng)實現(xiàn)時空特異性基因敲除
三、大規(guī)模隨機基因敲除技術
四、miRNA敲除小鼠證實miRNA在哺乳動物中的生理功能
五、顯微注射技術的改良
六、基因打靶的應用前景
參考文獻
第六章 轉基因及其表達的檢測
第一節(jié) 外源基因整合的檢測
一、聚合酶鏈式反應
二、Southern印跡雜交法
三、DNA斑點雜交
四、染色體原位雜交
五、原位聚合酶鏈式反應(in situ PCR)
第二節(jié) 外源基因在轉錄水平的檢測
一、反轉錄一聚合酶鏈式反應(RT-PCR)
二、Northern印跡雜交法
三、RNA斑點雜交
四、RNA原位雜交
五、原位反轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)
六、RNase保護分析
七、反轉錄差異顯示技術
第三節(jié) 外源基因在翻譯水平的鑒定
一、酶聯(lián)免疫吸附劑測定
二、Western印跡法
三、免疫組織化學染色法
四、報告基因
五、雙向電泳
參考文獻
第七章 轉基因動物技術在生物及醫(yī)學研究中的應用
第一節(jié) 轉基因動物技術在研究哺乳動物發(fā)育中的應用
一、轉錄因子與發(fā)育紊亂
二、轉錄因子與心臟發(fā)育
第二節(jié) 轉基因動物技術在基因表達調控研究中的應用_
一、利用轉基因動物可研究基因在發(fā)育中的時空調控
二、轉基因動物技術可探討目的基因突變所致的異常表型以研究基因功能
第三節(jié) 轉基因動物技術在醫(yī)學研究中的應用
一、在腫瘤學研究中應用
二、在免疫學研究中的應用
三、在遺傳性疾病研究中的應用_
四、在病毒性疾病研究中的應用
五、在改良和培育動物新品種的應用
六、在生物活性物質研制生產中的應用
第四節(jié) 人類疾病的轉基因動物模型
一、神經系統(tǒng)疾病的轉基因動物模型
二、聽覺和視覺疾病的轉基因小鼠模型
三、心血管疾病的轉基因動物模型
四、骨、軟骨疾病的轉基因小鼠模型
五、癌癥的轉基因小鼠模型
六、代謝和激素疾病的轉基因小鼠模型
七、病毒性疾病轉基因小鼠模型
八、其他疾病的轉基因動物模型
……
第八章 轉基因動物技術在生物制藥中的應用
第九章 轉基因動物技術在異種器官移植中的應用
第十章 轉基因技術的安全與倫理問題
參考文獻