酶的凝膠電泳檢測手冊

第1章　簡介
　參考文獻(xiàn)
第2章　酶凝膠電泳檢測的基本原理
　2.1　顯色反應(yīng)
　　2.1.1　能還原四唑鹽的產(chǎn)物
　　2.1.2　能與重氮鹽偶聯(lián)的產(chǎn)物
　　2.1.3　引起pH值變化的產(chǎn)物
　　2.1.4　正磷酸
　　2.1.5　焦磷酸
　　2.1.6　過氧化氫
　　2.1.7　碳酸根離子
　　2.1.8　有色產(chǎn)物
　　2.1.9　帶有還原型巰基的產(chǎn)物
　　2.1.10　影響淀粉碘反應(yīng)的產(chǎn)物
　　2.1.11　聚合酶的產(chǎn)物
　　2.1.12　解聚酶的產(chǎn)物
　2.2　熒光生成反應(yīng)
　　2.2.1　NADH和NADPH
　　2.2.2　4-甲基傘形酮
　　2.2.3　形成發(fā)光鑭系金屬螯合物的產(chǎn)物
　　2.2.4　其它
　2.3　放射自顯影
　2.4　生物自顯影
　2.5　二維凝膠光譜分析
　2.6　蛋白質(zhì)印跡
　　2.6.1　固定化基質(zhì)
　　2.6.2　蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)移
　　2.6.3　特異性的抗體和標(biāo)記的抗抗體
　　2.6.4　檢測印跡中被轉(zhuǎn)移的蛋白質(zhì)
　2.7　其它方法
　　2.7.1　將不溶于水的底物摻入分離凝膠進(jìn)行檢測
　　2.7.2　脂代謝酶的檢測
　　2.7.3　通過二維電泳進(jìn)行檢測
　　2.7.4　用特異性探針檢測酶蛋白
　　　2.7.4.1　以標(biāo)記的適配體和適配體信標(biāo)作為特異性探針
　　　2.7.4.2　以標(biāo)記的抑制劑作為特異性探針
　　2.7.5　一些非酶蛋白的特異性檢測
　　　2.7.5.1　用反向酶譜檢測蛋白酶和核酸酶的抑制蛋白
　　　2.7.5.2　以生物素標(biāo)記的蛋白酶為特異性探針檢測蛋白酶抑制蛋白
　　　2.7.5.3　生物素標(biāo)記的乙酰透明質(zhì)酸作為特異性探針檢測乙酰透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白
　　　2.7.5.4　轉(zhuǎn)鐵蛋白
　參考文獻(xiàn)
第3章　特異性酶的檢測方法
　3.1　酶單頁的結(jié)構(gòu)
　參考文獻(xiàn)
　3.2　一般原則、評價(jià)和建議
　　3.2.1　酶電泳和檢測的支持介質(zhì)的選擇
　　　3.2.1.1　醋酸纖維素凝膠
　　　3.2.1.2　聚丙烯酰胺凝膠
　　　3.2.1.3　淀粉凝膠
　　3.2.2　凝膠染色的策略
　　　3.2.2.1　酶譜方法的選擇
　　　3.2.2.2　染色液的制備
　　　3.2.2.3　染色液的使用方式
　　　3.2.2.4　增強(qiáng)酶活性條帶染色強(qiáng)度的方式
　　　3.2.2.5　酶譜方法的特異性和一些相關(guān)問題
　　3.2.3　記錄和保存酶譜
　　3.2.4　節(jié)省資源的策略
　　　3.2.4.1　在同一塊凝膠上同時(shí)檢測幾種酶
　　　3.2.4.2　在同一塊凝膠上連續(xù)檢測不同的酶
　　　3.2.4.3　染色液的重復(fù)使用
　　　3.2.4.4　在一塊凝膠上使用幾個(gè)原點(diǎn)
　　　3.2.4.5　用電印跡法對電泳凝膠進(jìn)行多次復(fù)制
　　　3.2.4.6　使用半制備凝膠產(chǎn)生連接酶制備物
　　3.2.5　疑難解答
　　3.2.6　安全規(guī)則
　參考文獻(xiàn)
　3.3　酶單頁酶單頁中常用的縮寫附錄
附錄
附錄A-1　Escherichia coli的基本培養(yǎng)基
附錄A-2　Pediococcus cerevisiae的檸檬酸鹽培養(yǎng)基
附錄B-1　酶的目錄（中文）
附錄B-2　酶的目錄（英文）
附錄C　酶的電泳所用的緩沖系統(tǒng)
附錄D　非常用化合物中英文名稱對照