分子生物學實驗指導

第一部分　分子生物學常用材料的基本知識
　第一章　大腸桿菌、質(zhì)粒和噬菌體
　　第一節(jié)　大腸桿菌
　　第二節(jié)　質(zhì)粒和噬菌體
　第二章　工具酶
　　第一節(jié)　限制性內(nèi)切核酸酶
　　第二節(jié)　限制性作圖
　　第三節(jié)　用于修飾與放射性標記核酸的酶
　　第四節(jié)　重組DNA分子的構(gòu)建　
第二部分　學生　實驗
　實驗一　質(zhì)粒DNA的制備
　實驗二　質(zhì)粒DNA的電泳檢查
　實驗三　感受態(tài)細菌的制備及轉(zhuǎn)化
　實驗四　入噬菌體的制備
　實驗五　入DNA的制備
　實驗六　單個M13噬菌體的分離
　實驗七　從M13噬菌體載體中制備單鏈噬菌體DNA
　實驗八　M13噬菌體雙鏈復制型DNA的制備
　實驗九　哺乳動物基因組DNA的制備（哺乳動物血液DNA的制備）
　實驗十　植物基因組DNA的制備
　實驗十一　細菌基因組DNA的制備（小量制備細菌基因組DNA）
　實驗十二　基因組DNA的電泳分析
　實驗十三　組織培養(yǎng)細胞質(zhì)RNA的制備（一步法從培養(yǎng)細胞或組織中分離RNA）
　實驗十四　植物RNA的制備（植物RNA的制備（酚／SDS法）
　實驗十五　細菌RNA的制備
　實驗十六　帶有poly（A）RNA的制備
　實驗十七　DNA的限制性內(nèi)切核酸酶酶切分析
　實驗十八　PCR擴增DNA中的引物設計
　實驗十九　PCR擴增DNA中的模板的制備
　實驗二十　PCR擴增DNA的基本反應
　實驗二十一　限制性內(nèi)切核酸酶部分消化法作物理圖譜
　實驗二十二　DNA酶切片段的回收
　實驗二十三　DNA體外重組
　實驗二十四　Southern吸?。ê怂犭s交技術）
　實驗二十五　Norther’n雜交
　實驗二十六　SDS—PAGE
　實驗二十七　Western吸?。ǖ鞍踪|(zhì)的免疫印跡技術）
　實驗二十八　哺乳動物細胞核或細胞質(zhì)內(nèi)蛋白的提取
　實驗二十九　用凝膠電泳進行遷移率改變試驗檢測：DNA結(jié)合
　實驗三十　甲基化和尿嘧啶干擾反應分析蛋白質(zhì)DNA的作用
　實驗三十一　DNase　I足跡法分析蛋白DNA結(jié)合位點　
開放實驗　學生自己設計一套　實驗
　設計一　克隆并鑒定一個真核單拷貝基因
　設計二　在原核中克隆表達并純化一個真核基因產(chǎn)物
　設計三　現(xiàn)有犯罪現(xiàn)場罪犯的血跡和三個犯罪嫌疑人的血樣，請用分子生物學手段確定罪犯
附錄A　聚丙烯酰胺凝膠的配制
附錄B　分子克隆中使用的試劑與緩沖液的配制