生物化學與分子生物學綜合大實驗

第一篇常用生物化學與分子生物學實驗技術(shù)及原理
第一章載體1
第二章PCR基因擴增8
第三章DNA重組16
第四章基因分析與檢測27
第五章基因表達53
第六章基因突變和蛋白質(zhì)工程67
第七章層析技術(shù)78
第八章電泳技術(shù)90
第九章蛋白質(zhì)的分離純化101
第十章蛋白質(zhì)的分析技術(shù)108
第十一章酶工程與固定化酶119
第十二章基因工程蛋白的發(fā)酵與制備技術(shù)126
參考文獻132
第二篇學生實驗
實驗一質(zhì)粒DNA的提取及其定性定量分析133
實驗二大腸桿菌基因組DNA的分離137
實驗三PCR法擴增大腸桿菌堿性磷酸酶基因139
實驗四質(zhì)粒DNA與目的DNA的雙酶切和連接142
實驗五感受態(tài)細胞的制備和重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化144
實驗六重組子的篩選與鑒定147
實驗七重組堿性磷酸酶的發(fā)酵培養(yǎng)149
實驗八發(fā)酵產(chǎn)物(堿性磷酸酶)的檢測分析151
實驗九發(fā)酵產(chǎn)物（堿性磷酸酶）的分離純化155
實驗十堿性磷酸酶分離純化參數(shù)的測定157
實驗十一堿性磷酸酶的純度鑒定及其亞基分子量測定159
實驗十二堿性磷酸酶的酶學性質(zhì)分析162
實驗十三堿性磷酸酶的變性及復性作用研究166
實驗十四堿性磷酸酶的固定化及固定化酶的特性研究169
實驗十五堿性磷酸酶的定點突變（PCR法）172
實驗十六堿性磷酸酶及其突變體的結(jié)構(gòu)與功能研究175
附錄
一、常用單位及換算方法179
二、常用核酸、蛋白質(zhì)換算數(shù)據(jù)179
三、氨基酸符號及相應密碼子180
四、常見市售酸堿的濃度及近似pH值180
五、硫酸銨飽和度的常用表181
六、離心機轉(zhuǎn)速與相對離心力的換算183
七、層析法常用數(shù)據(jù)185
八、常用的電泳緩沖液及凝膠加樣緩沖液191
九、常用限制性內(nèi)切酶酶切位點及緩沖液192
十、分子生物學常用緩沖液和試劑的配制193
十一、生化常用緩沖液的配制196
十二、常用細菌培養(yǎng)基和抗生素溶液199
十三、小鼠腹水多克隆抗體的制備和檢測202