干細胞實驗指南

序
前言
第1章 干細胞的分離純化
1．1 密度梯度離心法
1．2 單抗貼壁鋪展法
1．3 免疫磁珠分選技術(shù)
1．4 流式細胞分選法
1．5 組織消化法
主要參考文獻
第2章 干細胞的鑒定
2．1 光學(xué)顯微鏡
2．2 電子顯微鏡
2．3 共聚焦顯微鏡
2．4 流式細胞術(shù)鑒定特異基因的表達
主要參考文獻
第3章 胚胎干細胞體外培養(yǎng)與定向誘導(dǎo)分化
3．1 胚胎干細胞分離培養(yǎng)
3．2 小鼠胚胎干細胞定向誘導(dǎo)分化
主要參考文獻
第4章 成體干細胞分離培養(yǎng)擴增及體外分化
4．1 造血干／祖細胞
4．2 間充質(zhì)干細胞
4．3 神經(jīng)干細胞
4．4 血管內(nèi)皮祖細胞
4．5 肌肉干細胞
4．6 肝臟干細胞
4．7 胰腺干細胞
4．8 皮膚干細胞的擴增及定向誘導(dǎo)分化
主要參考文獻
第5章干細胞體內(nèi)增殖分化
5．1 干細胞向成體動物體內(nèi)移植——nod／scid小鼠造血干／祖細胞移植
5．2 干細胞向動物胚胎移植——胚胎干細胞囊胚植入構(gòu)建嵌合體
5．3 體內(nèi)可見光成像技術(shù)用于干細胞研究
主要參考文獻
第6章干細胞增殖、分化及其調(diào)控的分析檢測
6．1 干細胞細胞周期檢測技術(shù)
6．2 干細胞分化檢測
6．3 干細胞增殖分化調(diào)控的研究策略
6．4 常規(guī)操作
6．5 增殖分化調(diào)控機制的研究
6．6 干細胞增殖分化調(diào)控研究范例i——由生命現(xiàn)象到功能分子
6．7 干細胞增殖分化調(diào)控研究范例ii——由功能分子到生命現(xiàn)象的調(diào)控
主要參考文獻
第7章 核移植技術(shù)
7．1 總論
7．2 核移植操作所需的主要設(shè)備與試劑
7．3 核移植技術(shù)的主要操作步驟
7．4 核移植技術(shù)的注意事項及影響因素
主要參考文獻
第8章 基因打靶技術(shù)
8．1 打靶載體構(gòu)建
8．2 中靶es細胞的篩選
主要參考文獻
第9章 干細胞與組織工程實驗技術(shù)
9．1 干細胞與骨組織工程
9．2 干細胞與軟骨組織工程
9．3 干細胞與皮膚組織工程
9．4 干細胞與肌腱組織工程
9．5 干細胞與心肌組織工程
9．6 干細胞與血管組織工程
9．7 干細胞與肝組織工程
主要參考文獻
第10章 干細胞的保存與復(fù)蘇
10．1 造血干細胞低溫保存的生物學(xué)基礎(chǔ)
10．2 冷凍保護液的選擇
10．3 冷凍保存方法的選擇
10．4 冷凍保存的設(shè)備
10．5 造血干細胞的低溫保存方法
主要參考文獻
第11章 干細胞治療的臨床前研究
11．1 有效性研究
11．2 安全性研究
11．3 干細胞的采集、分離、鑒定及體外操作的質(zhì)量控制
第12章 干細胞治療的臨床(試驗)研究
12．1 臨床研究的產(chǎn)生及籌劃
12．2 臨床研究的不同階段
12．3 干細胞治療的臨床新技術(shù)申請
12．4 干細胞相關(guān)的臨床試驗研究示例
主要參考文獻
第13章 干細胞與基因治療
13．1 基因治療概述
13．2 病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗技術(shù)
13．3 干細胞的轉(zhuǎn)染
13．4 以干細胞為基因?qū)氚屑毎幕蛑委熍R床應(yīng)用策略及前景
主要參考文獻
附錄1 縮略語
附錄2 常用溶液配制方法
附錄3 主要共聚焦激光對應(yīng)常用熒光染料表
附錄4 合適小鼠卵的培養(yǎng)基配方(g/l)
附錄5 zimmermann細胞融合培養(yǎng)基成分(ph7．0)
附錄6 補加鍶的m16培養(yǎng)基
附錄7 fda／nih關(guān)于基因治療的相關(guān)文獻