蛋白折疊液相色譜法

前言
第一章 緒論
§1．1 蛋白折疊液相色譜法的定義
§1．2 蛋白折疊液相色譜法的特色
§1．3 發(fā)展史
§1．4 本書的內容
參考文獻
第二章 蛋白質的結構與構象變化
§2．1 概述
§2．2 蛋白質分子的化學結構
§2．3 蛋白質分子的空間結構
2．3．1 蛋白質二級結構
2．3．2 超二級結構
2．3．3 結構域
2．3．4 三級結構
2．3．5 四級結構
§2．4 穩(wěn)定蛋白質分子構象的作用力
§2．5 蛋白質分子構象的研究方法
2．5．1 X射線衍射結構分析法
2．5．2 圓二色性光譜法
2．5．3 紫外差示光譜法
2．5．4 熒光光譜法
2．5．5 激光拉曼光譜法
2．5．6 氫同位素交換法
2．5．7 核磁共振法
參考文獻
第三章 液相色譜對生物大分子構象變化的表征
§3．1 概述
§3．2 液相色譜中的計量置換保留理論
§3．3 Z和lgI對生物大分子構象變化的表征
§3．4 RPLC中Z和lgI對生物大分子構象變化的表征
3．4．1 Z值與蛋白質相對分子質量
3．4．2 蛋白質構象的始末狀態(tài)
3．4．3 RPLC中甲酸濃度與生物大分子的構象變化
3．4．4 Z值與離子對試劑
3．4．5 蛋白質熱變性的表征
3．4．6 RPLC中Z對白細胞介素-2突變蛋白分子的構象變化的表征
3．4．7 不同變性態(tài)條件下Lys的構象表征
3．4．8 在RPLC中人工交聯修飾蛋白保留行為及其Z和lgI值的表征
3．4．9 重組人干擾素-r在有孔與無孔反相硅膠固定相上保留行為的比較
§3．5 HIC中蛋白分子構象的Z表征
3．5．1 HIC中在變性劑存在條件下z值的準確測定方法
3．5．2 脲濃度與蛋白質分子構象變化的z表征
3．5．3 胍濃度與蛋白質分子構象變化的Z表征
3．5．4 Z和lgI值的測定精度
§3．6 離子交換色譜中蛋白分子構象Z和lgI的表征
3．6．1 IEC中變性蛋白與Z和lgI值的測定
3．6．2 不同變性狀態(tài)下Lys的弱陽離子交換色譜保留
3．6．3 不同脲濃度下Lys與z值
3．6．4 Z對還原變性Lys活性回收率隨脲濃度變化趨勢
3．6．5 Z對Lys分子構象變化的定量表征
3．6．6 lgI對Lys分子構象變化的定量表征
3．6．7 不同構象Lys分子與固定相的親和力
參考文獻
第四章 蛋白折疊
§4．1 概述
§4．2 包涵體
4．2．1 包涵體的特性及其形成原因
4．2．2 包涵體蛋白質的生產程序
4．2．3 包涵體的分離和純化
4．2．4 包涵體的溶解
4．2．5 包涵體蛋白的復性
4．2．6 蛋白折疊的發(fā)展近況
§4．3 蛋白質的變性
§4．4 蛋白質的失活
§4．5 蛋白折疊中間體的研究
§4．6 蛋白折疊機理
4．6．1 熱力學模型
4．6．2 動力學模型
4．6．3 蛋白多肽鏈折疊的模型介紹
§4．7 蛋白質的復性方法
4．7．1 稀釋法
4．7．2 透析法
4．7．3 超濾法
4．7．4 新發(fā)展的復性方法
參考文獻
第五章 液相色譜法對變性蛋白的折疊
§5．1 概述
§5．2 各種LC復性的熱力學基礎-化學平衡
§5．3 排阻色譜
5．3．1 SEC復性的原理
5．3．2 SEC復性的影響因素
5．3．3 SEC復性方法的改進
5．3．4 SEC復性法的應用
5．3．5 重組人粒細胞集落刺激因子的SEC復性
§5．4 離子交換色譜
5．4．1 用弱陽離子交換色譜法復性溶菌酶
5．4．2 用強陰離子交換色譜法(SAX)復性并同時純化rhG-CSF
§5．5 親和色譜
§5．6 疏水相互作用色譜
§5．7 各種LC復性方法的比較
§5．8 HPHIC對變性蛋白的折疊與復性舉例
5．8．1 HPHIC對非還原變性蛋白的復性
5．8．2 HPHIC對還原變性牛胰島素的折疊
5．8．3 HPHIC純化并同時復性E．coli如表達的重組牛朊病毒正常蛋白片斷
5．8．4 HPHIC對還原變性溶菌酶的復性
§5．9 HPHIC進行蛋白折疊的分子學機理
5．9．1 變性蛋白在HPHIC固定相上的吸附及微區(qū)的形成——固定相對蛋白折疊的貢獻
5．9．2 流動相對蛋白折疊的貢獻
5．9．3 HPIHIC固定相和流動相的協(xié)同作用在蛋白折疊過程中的作用
5．9．4 HPHIC法折疊蛋白與“人工分子伴侶”
§5．10 影響HPHIC對蛋白復性的因素
5．10．1 固定相
5．10．2 流動相
5．10．3 色譜條件
§5．11 用LC法對蛋白復性的展望
參考文獻
第六章 液一固界面上變性蛋白折疊自由能的測定
§6．1 概述
§6．2 液一固界面上蛋白折疊自由能測定的理論基礎
§6．3 蛋白折疊自由能的測定
6．3．1 不同濃度變性劑存在下蛋白質的lgj和Z值
6．3．2 液一固界面上蛋白折疊自由能的測定
§6．4 蛋白折疊途徑中能壘與能阱
6．4．1 能壘和能阱的定義
6．4．2 蛋白折疊途徑中的能量表征
6．4．3 蛋白活性與△△Gf
參考文獻
第七章 變性蛋白復性與同時純化裝置
§7．1 概述
§7．2 短柱理論
7．2．1 短柱理論表達式的推導
7．2．2 短柱對生物大分子的分離效果
§7．3 色譜餅——變性蛋白復性與同時純化裝置
7．3．1 色譜餅的性能
7．3．2 不同規(guī)格色譜餅對標準蛋白的色譜分離
§7．4 色譜餅用于蛋白復性與同時純化
7．4．1 色譜餅對核糖核酸酶A和溶菌酶的復性及同時分離
7．4．2 人血清白蛋白的快速純化
7．4．3 用色譜餅純化蛋清中溶菌酶
§7．5 快速蛋白純化色譜柱
7．5．1 快速蛋白純化柱的形狀及結構
7．5．2 色譜柱的柱壓
7．5．3 疏水型快速蛋白純化柱對標準蛋白的分離
7．5．4 離子交換型快速蛋白純化柱對標準蛋白的分離
7．5．5 柱壽命的測定
7．5．6 快速蛋白純化柱質量負載的測定
§7．6 應用舉例
7．6．1 疏水型快速蛋白純化柱對變性溶菌酶的復性
7．6．2 快速蛋白純化柱對豬心中細胞色素c的純化
7．6．3 快速蛋白純化柱對粗曠淀粉酶的純化
7．6．4 疏水型快速蛋白純化柱對重組人干擾素-r的復性與同時純化
§7．7 蛋白質復性及同時純化的策略
7．7．1 用HIC復性蛋白的一般策略
7．7．2 用IEC復性蛋白的一般策略
參考文獻
第八章 重組蛋白藥物的復性與同時純化及其工業(yè)化生產舉例
§8．1 概述
§8．2 重組蛋白藥物的復性與同時純化
8．2．1 蛋白質復性及同時純化裝置對IL-2-Ang復性
8．2．2 重組人胰島素原的復性及同時純化
8．2．3 對某大學重組蛋白樣品的純化
8．2．4 蛋白質復性及同時純化裝置對rhG-CSF復性
8．2．5 重組人干細胞因子的復性并同時純化
8．2．6 SAX型快速蛋白純化柱對重組人粒細胞一巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的復性并同時純化
8．2．7 在工業(yè)上用疏水相互作用色譜復性和純化干擾素-r
8．2．8 膨脹床色譜用于蛋白復性
8．2．9 模擬移動床用于蛋白復性
8．2．10 連續(xù)環(huán)狀色譜復性
參考文獻
第九章 典型實驗
§9．1 色譜餅的使用
§9．2 科林快速蛋白純化柱的測試
§9．3 實驗一科林快速蛋白純化柱柱效的檢測
§9．4 實驗二科林快速蛋白純化柱對豬心中細胞色素c的分離與純化
§9．5 實驗三科林快速蛋白純化柱對變性溶菌酶和核糖核酸酶復性與同時純化
§9．6 實驗四科林快速蛋白純化柱對重組人干擾素-r的復性及同時純化
§9．7 實驗五色譜餅對標準蛋白分離性能的檢測
§9．8 實驗六科林快速蛋白純化柱對還原變性溶菌酶的復性