免疫學常用實驗技術(shù)

第一章　多克隆抗體制備
第一節(jié)　動物免疫與采血
一、免疫原
二、佐劑
三、動物選擇
四、免疫方法
五、免疫動物采血
六、抗原免疫實例
第二節(jié)　抗體純化
一、鹽析法
二、凝膠柱層析
三、應(yīng)用舉例――重組蛋白抗體制備
第三節(jié)　抗體保存
第二章　單克隆抗體制備
一、試劑與器材
二、實驗流程
三、關(guān)鍵點
四、應(yīng)用舉例
第三章　酶免疫測定技術(shù)
一、實驗原理
二、試劑與材料
三、基本流程
四、關(guān)鍵點
第四章　放射標記技術(shù)
第一節(jié)　抗原放射性核素標記
一、氯胺T標記法
二、Iodogen標記法
三、125I標記復(fù)合物的分離
第二節(jié)　放射免疫分析技術(shù)
一、實驗原理
二、主要技術(shù)條件
第三節(jié)　免疫放射分析
第四節(jié)　應(yīng)用舉例
一、人卵泡休止素放射免疫分析
二、人卵泡休止素免疫放射分析
三、關(guān)鍵點
第五節(jié)　免疫細胞受體放射分析 第五章　免疫細胞化學技術(shù)
一、試劑配制
二、器材準備
三、實驗基本流程
四、關(guān)鍵點
五、常見問題及解決辦法
六、應(yīng)用舉例
第六章　經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)
第一節(jié)　凝集反應(yīng)
一、直接凝集反應(yīng)
二、間接凝集反應(yīng)
第二節(jié)　沉淀反應(yīng)
一、單向免疫擴散試驗
二、雙向免疫擴散試驗
第三節(jié)　補體的測定
一、血清補體總活性測定
二、C4溶血活性的測定
第四節(jié)　循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）的測定
第七章　抗原分離、純化與鑒定
第一節(jié)　抗原粗分離
第二節(jié)　抗原精制
一、吸附層析
二、離子交換層析
三、凝膠過濾層析
四、親和層析
五、高效液相色譜法
六、離心法
第三節(jié)　抗原性質(zhì)鑒定
第四節(jié)　應(yīng)用舉例
一、離子交換層析分離血清蛋白抗原
二、親和層析法純化甲胎蛋白
第八章　免疫印跡
第一節(jié)　蛋白質(zhì)抗原電泳分離
一、樣本處理
二、凝膠的選擇
三、蛋白標準品的選擇
第二節(jié)　蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)膜
一、半干式電轉(zhuǎn)印
二、濕式電轉(zhuǎn)印
第三節(jié)　雜交
一、抗體的選擇
二、封閉
三、抗體雜交
第四節(jié)　檢測
一、放射性核素檢測
二、辣根過氧化物酶――ECL法
三、堿性磷酸酶法
四、關(guān)鍵點
第五節(jié)　應(yīng)用舉例
第九章　免疫沉淀
一、細胞裂解
二、免疫沉淀抗原-抗體復(fù)合物
三、抗原-抗體復(fù)合物法應(yīng)用舉例
四、三分子復(fù)合物法應(yīng)用舉例
第十章　免疫細胞分離
第一節(jié)　外周血白細胞分離
一、低滲分離
二、聚蔗糖-泛影葡胺分離法
三、聚乙烯吡咯烷酮硅膠分離法
第二節(jié)　單核巨噬細胞分離
一、腹腔巨噬細胞分離
二、脾巨噬細胞分離
三、單核細胞純化
第三節(jié)　T、B淋巴細胞選擇性分離
一、E花環(huán)分離T細胞
二、尼龍毛分離T細胞
三、B細胞分離
第四節(jié)　NK細胞分離
一、Percoll不連續(xù)密度梯度分離法
二、磁化細胞分離器分離法
第五節(jié)　中性粒細胞分離
一、小量分離法
二、大量分離法
第六節(jié)　樹突狀細胞分離
第十一章　流式細胞儀檢測技術(shù)
一、實驗原理
二、實驗應(yīng)用
三、實驗方法
四、應(yīng)用舉例
五、關(guān)鍵點
第十二章　淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗
一、試劑配制
二、材料準備
三、基本流程
四、關(guān)鍵點
五、B淋巴細胞增殖實驗
第十三章　細胞硅實驗技術(shù)
第一節(jié)　NK細胞活性測定
一、放射性核素釋放法
二、乳酸脫氫酶釋放法
第二節(jié)　細胞毒性T細胞功能測定
第三節(jié)　補體依賴性細胞毒試驗
第十四章　吞噬功能及溶血空斑？驗
一、中性粒細胞吞噬功能測定
二、小鼠巨噬細胞吞噬功能測定
三、人巨噬細胞吞噬功能測定
四、小鼠B細胞溶血空斑形成試驗
第十五章　細胞因子活性檢測
一、IL-1生物學活性檢測
二、IL-2生物學活性檢測
三、IL-4生物學活性檢測
四、IL-6生物學活性檢測
五、IL-8生物學活性檢測
六、IL-10生物學活性檢測
七、腫瘤壞死因子生物學活性檢測
第十六章　免疫細胞凋亡
第一節(jié)　細胞形態(tài)學觀察法
一、普通光學顯微鏡觀察方法
二、熒光顯微鏡觀察方法
第二節(jié)　寡核苷酸片段檢測法
一、普通瓊脂糖凝膠電泳法
二、定量瓊脂糖凝膠電泳法
三、ELISA檢測法
第三節(jié)　流式細胞儀
一、PI單染色法
二、Hoechst　33342/PI雙染色法