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第一章 基因工程的理論依據與發(fā)生發(fā)展
一、分子生物學與基因工程(Genetic Engineering)的概念和意
二、基因工程誕生的歷史背景
三、基因工程的理論依據和技術特點
四、基因工程的研究成就與展望
五、諾貝爾獎(Nobel Prize)與分子生物學
第二章 基因工程實驗室的裝備
一、實驗室的基本要求
二、水的凈化裝置
三、離心機實驗室
四、電泳技術(Electrophoresis)
五、層析技術(Chromatography)
六、DNA合成儀
七、DNA測序儀
八、PCR儀
九、核素實驗室
十、細胞培養(yǎng)室
十一、其他
第三章 柱酸的結構、功能與純化
一、核酸的種類、結構、分布與功能概述
二、DNA、基因與染色體的分子解剖學
三、核仁、核糖體與RNA
四、DNA的純化、濃縮、沉淀、定量、貯存
第四章 DNA的復制、修復與分離、提取
一、DNA的復制一半保留復制(Semiconservative Replication)
二、DNA的損傷與修復
三、逆轉錄(Reverse Transcription)
四、核酸的分離提取
五、從全血中提取白細胞DNA
六、真核細胞染色體DNA的制備
七、質粒和噬菌體DNA的提取與純化
八、DNA片段的分離與純化
九、真核細胞RNA的分離與純化
十、mRNA的分離與純化
十一、核酸的快速分離與純化
第五章 基因克隆技術
一、概述
二、基因克隆(Gene Cloning)的概念
三、制備目的基因
四、DNA的切斷與連接—DNA限制性內切酶(Restriction Enzymes)
五、目的基因和載體連接,制成DNA重組體
六、將DNA重組體導人宿主細胞
七、DNA重組體的篩選與鑒定
八、基因克隆的應用
九、基因組文庫(genomic library)的構建
十、cDNA文庫的構建
第六章 DNA的變性復性與聚合酶鏈反應(PCR)
一、DNA的變性與復性
二、PCR技術的概念與意義
三、PCR的基本原理和標準條件
四、PCR反應模板的準備
五、PCB反應引物設計
六、耐熱DNA多聚酶(Taq DNA polymerase)
七、PCR反應緩沖液及核苷酸底物
八、PCR反應條件的選擇與自動化操作
九、PCR擴增產物的分析與鑒定
十、預防假陽性與假陰性—PCR污染問題
十一、PCR技術的種類與發(fā)展
十二、PCR技術的應用
第七幸 核酸分子探針的標記
一、核酸探針與分子雜交的概念
二、核酸分子探針的種類、特性及其制備方法
三、標記物的種類及其特性
四、各種標記方法及其選擇
五、標記探針的結合率、產量及比放射活性的測定
六、標記探針的純化
第八章 核酸分子雜交技術
一、概念
二、固相液相雜交亦稱膜上印跡雜交
三、核酸原位雜交技術
第九章 DNA序列測定
一、概述
二、Maxam—Gilbert化學降解法
三、Sanger的酶法
四、利用PCR及銀染法測序
五、雜交測序(SBH)和套式鏈雜交測序(SNSH)
六、RNA序列測定
七、DNA序列的計算機處理
第十章 DNA的人工化學合成
一、概述
二、DNA的酶促合成
三、DNA化學合成原理
四、DNA的合成方法、純化及鑒定
五、DNA化學合成的應用
第十一章 原柱與真核基因表達
一、概述
二、基因的轉錄與轉錄后加工
三、基因的翻譯或蛋白質的生物合成
四、外源基因在原核細胞中的表達
五、外源細胞基因在真核細胞中的表達
第十二章 轉基因動物
一、概述
二、建立轉基因動物的方法
三、轉基因鼠系的建立與鑒定
四、轉基因動物的應用
第十三章 基因工程抗體技術
一、概述
二、嵌合抗體的制備
三、小分子抗體的制備
四、噬菌體抗體庫技術(Phage antibody library technique)
第十四章 基因診斷技術
一、基因診斷的概念與特點
二、基因診斷的理論基礎與內容
三、基因診斷的方法
四、基因診斷在臨床醫(yī)學中的應用
第十五章 人類疾病的基因治療技術
一、概述
二、基因轉入的方法
三、基因治療方法的設計
四、遺傳病的基因治療
五、腫瘤的基因治療
六、病毒性感染的基因治療